Desenvolvimento de superfície de titânio bioativa por meio de alcalinização e recobrimento com naringenina, visando o reparo peri-implantar: estudo in vitro
Resumo
A osseointegração dos implantes orais está diretamente relacionada à sua interação com as células dos tecidos peri-implantares, que ocorre por meio de eventos como adesão à superfície do implante e à produção de matriz mineralizada, além de modulação da resposta inflamatória. Modificações da superfície dos implantes podem promover melhor interação celular, acelerando o processo de reparo dos implantes osseointegrados. Este estudo avaliou o efeito da modificação de superfície de titânio por meio da alcalinização com hidróxido de sódio (NaOH), associada ou não à naringenina, para o desenvolvimento de superfícies bioativas, visando melhorar a adesão e o metabolismo de osteoblastos humanos, o que pode acelerar o reparo peri-implantar. Inicialmente, os osteoblastos humanos foram expostos a diferentes concentrações de naringenina por 24, 48 ou 72 h, a fim de selecionar concentrações não- citotóxicas de 10, 5, 1, 0,5 µg/mL. Discos de titânio usinados foram obtidos e padronizados com lixas d´agua 400,600,1200. Estes discos foram então submetidos à alcalinização com NaOH a 5 mol/L por 24 h, a 60oC. A topografia e rugosidade superficiais foram verificadas por meio de microscopia confocal. Os grupos experimentais foram divididos de acordo com os tratamentos propostos: discos alcalinizados, discos alcalinizados associados à naringenina. Os osteoblastos foram cultivados sobre os discos de titânio com diferentes superfícies (2 x 104 células/ disco), previamente colocados em placas de 24 compartimentos, utilizando meio de cultura DMEM completo. Após diferentes períodos, foram avaliadas: a adesão celular, viabilidade, síntese de metaloproteinase-2 (MMP-2), atividade de fosfatase alcalina (ALP), deposição de nódulos de mineralização e expressão gênica de ALP. A topografia dos discos e a adesão celular foram avaliadas qualitativamente; os dados de rugosidade superficial, viabilidade, atividade de ALP e deposição de nódulos foram submetidos ao teste estatístico t-Student, enquanto os dados de síntese de MMP-2 e expressão de ALP foram analisados por meio do teste ANOVA a dois fatores, com pós-teste de Tukey (nível de significância de 5%). Os osteoblastos cultivados sobre a superfície alcalinizada associada à naringenina apresentaram maior adesão e espraiamento, bem como maior viabilidade, expressão e atividade de ALP e deposição de nódulos de mineralização. Na presença de naringenina, também foi observada modulação negativa da síntese de MMP 2. Verificou-se que a biomodificacao da superfície de titânio com naringenina favorece a adesão e o metabolismo de osteoblastos, o que pode acelerar o reparo peri- implantar e consequentemente o processo de osseointegração.