Avaliação da modificação da superfície de titânio na adesão de lipopolissacarídeos e osteoblastos

Abstract

Modificações na superfície do titânio (Ti) aumentam a rugosidade superficial e a área de contato do material com o tecido ósseo receptor. Apesar dos resultados promissores destas modificações sobre os tecidos peri-implantares, sua influência na adesão de produtos bacterianos ainda não foi completamente elucidada, sendo necessário a análise não só da rugosidade e topografia, mas também da adesão de lipopolissacarídeos (LPS) de Escherichia coli (E.coli) e na adesão e metabolismo de osteoblastos humanos.. Este estudo avaliou os efeitos da adesão de lipopolissacarídeos (LPS) sobre a superfície de discos de Ti puro tipo IV, sendo eles polidos e modificados por alcalinização (NaOH 5M) e ácido fluorídrico (HF 10%), sendo avaliado também a adesão de osteoblastos e a viabilidade destes. Os discos foram submetidos à análise de topografia e rugosidade superficiais através de MEV (microscopia eletrônica de varredura). Então, uma solução com LPS de Eschericha coli (1μg/mL) foi aplicada por 24 horas sobre a superfície de cada disco, seguido de análise da adesão do LPS por meio de microscopia de fluorescência (qualitativa) e intensidade de fluorescência em fluorímetro (quantitativa). A seguir, osteoblastos humanos (SaOs-2 – 2 x 104 células) foram cultivados sobre cada superfície. Após este período, foram determinadas a adesão celular, viabilidade e síntese de fator de necrose tumoral alfa (TNF-α). Os dados de rugosidade, adesão quantitativa, viabilidade celular e síntese de TNF-α foram submetidos aos testes de ANOVA a dois critérios e Tukey (α=0,05), enquanto os dados de topografia, adesão qualitativa do LPS e adesão celular foram analisados descritivamente. Os tratamentos alcalino e ácido resultaram em alteração da topografia e aumento significativo da rugosidade superficial média dos discos de titânio (p<0,05). Maior adesão de LPS ocorreu nos discos submetidos aos tratamentos ácido e alcalino, sendo que a superfície alcalinizada apresentou maior adesão qualitativa de LPS. Maior intensidade de fluorescência ocorreu nos discos tratados em comparação com os polidos. A adesão dos osteoblastos foi notadamente superior nas superfícies tratadas, porém, essa adesão foi prejudicada na presença de LPS. No que diz respeito à viabilidade celular, constatou-se um impacto negativo apenas nas células cultivadas sobre os discos tratados com NaOH na presença de LPS. Entretanto, a síntese de TNF-α foi mais elevada nas células expostas ao LPS em todas as superfícies testadas; contudo, as células cultivadas sobre a superfície polida foram as que apresentaram uma síntese mais acentuada desta citocina. Concluiu- se que os tratamentos ácidos e alcalinos da superfície de Ti favorecem a adesão do LPS além de modular a resposta de osteoblastos.