| dc.description.abstract | O osteossarcoma é um tumor ósseo relativamente raro quando comparado à outras neoplasias. Entretanto, este é um câncer com elevada capacidade de invadir e destruir tecidos moles, conferindo-lhe um caráter extremamente agressivo e metastático. A metástase está ligada principalmente com a transição epitélio mesenquimal (EMT) e degradação da matriz extracelular mediada por metaloproteinases (MMPs), pois esses processos aumentam a capacidade de migração e invasão celular, dois requisitos cruciais para que células tumorais provoquem metástase. A regulação de EMT e expressão de MMPs envolve a ação de diversos fatores transacionais, entre eles, a p53 e Sp1. A proteína supressora de tumor p53 é um regulador chave de importantes vias para a patogênese do osteossarcoma, incluindo metástase. A perda da função selvagem da p53 é um evento comum em osteossarcoma, bem como em outros tumores e está relacionada com proliferação celular, desenvolvimento de metástases e resistência à quimioterapia. Portanto, a busca por novas drogas antineoplásicas que levem em consideração o status da p53 pode melhorar o tratamento do osteossarcoma. Neste estudo, foi avaliado em linhagens celulares de osteossarcoma U2OS (p53 +/+), SAOS2 (p53 -/-) e MG-63 (p53 mutante), o potencial citotóxico e antimigratório de 67 chalconas derivadas da trans-chalcona, uma molécula capaz de induzir p53. No ensaio colorimétrico de MTT foi observado que, em geral, as chalconas foram mais citotóxicas contra linhagens expressando p53 e a presença de substituintes contendo NO2 ou átomos halogênicos (F, Br e Cl) contribuíram para a atividade das chalconas. No ensaio de wound-healing, para avaliar a atividade antimigratória, a maioria das chalconas foi mais ativa contra as linhagens com menor capacidade de migração (SAOS-2 e MG63), por outro lado, algumas chalconas demonstraram maior atividade antimigratória contra a linhagem expressando p53 selvagem (U2OS). Para estudar detalhadamente os mecanismos moleculares envolvidos na ação desses compostos, quatro chalconas foram selecionadas. Duas chalconas (G24 e G25) com significante atividade citotóxica e antimigratória e duas chalconas (D14 e D15) com baixa citotoxicidade, mas elevada capacidade de inibir migração em células expressando p53. Análises de citometria de fluxo e Western Blot indicaram que a capacidade das chalconas G24 e G25 inibirem a viabilidade celular, está relacionada com a indução de apoptose dependente de caspases. Ensaios utilizando Transwell demonstraram o potencial das quatro chalconas em inibirem a invasão celular e confirmaram a atividade antimigratória dependente de p53 das chalconas D14 e D15. Através da técnica de zimografia observou-se que a inibição da migração e invasão celular provocadas por D14, D15, G24 e G25 podem estar relacionadas com a diminuição da atividade das metaloproteinases MMP-2 e MMP-9. Por fim, ensaios de PCR e Western Blot evidenciaram a capacidade dessas moléculas, especialmente das chalconas D14 e D15, em induzir a expressão da proteína p53, além de regularem o processo de EMT através da indução de marcadores epiteliais (E-caderina) e repressão de marcadores mesenquimais (Vimentina, Slug, N-caderina e Beta-catenina) de forma dependente da p53. Assim, os resultados encontrados confirmam o potencial de chalconas como moléculas inibidoras de metástase e poderão auxiliar no desenho de chalconas com atividade antimetastática mais potentes e seletivas, que poderão ser utilizadas como modelo para o desenvolvimento de novos agentes quimioterapêuticos contra osteossarcoma. | pt_BR |
