Perfil de expressão gênica de Trichophyton rubrum exposto à glicoalcaloides de Solanum lycocarpum A. St.-Hil em meio de cultura contendo queratina e elastina

Abstract

O dermatófito Trichophyton rubrum é o agente causador mais frequente de dermatomicoses superficiais no Brasil e no mundo. São adaptados a crescerem na unha, pele e cabelo, através da utilização das proteínas do hospedeiro. A complexa interação do fungo com o hospedeiro pode ser compreendida através da identificação de genes diferencialmente expressos em meio de cultura adicionado de queratina e elastina, que simulam a infecção da pele humana. Além disso, apesar da importância das micoses, somente um número limitado de drogas antifúngicas está disponível atualmente no mercado devido à falta de alvos adequados, pois alguns são também muito tóxicos para humanos. Produtos naturais de origem vegetal podem conduzir ao descobrimento de novos agentes antimicrobianos, com possíveis novos mecanismos de ação. Glicoalcaloides de Solanum lycocarpum (conhecida popularmente como “fruta do lobo”) como a solamargina e solasonina apresentam relatos de atividade antifúngica devido ao bloqueio da germinação, crescimento, aumento da espessura das hifas e inibição quase total da esporulação. O objetivo do presente trabalho foi analisar o transcriptoma do dermatófito T. rubrum cultivado em meio de cultura contendo queratina e elastina adicionada de solamargina de S. lycocarpum por 30 min e 6 h. Através da análise dos dados de microarray foi observada a modulação de genes envolvidos na síntese de ergosterol, que podem estar relacionados ao mecanismo de ação antifúngico da solamargina contra T. rubrum. Nesse sentido, pode-se ressaltar a repressão do gene ERG1 em meio com queratina e elastina na presença de solamargina. Esse gene codifica a enzima esqualeno epoxidase, uma enzima chave da biosíntese de ergosterol, que é um componente vital para a membrana plasmática da célula fúngica. Além deste, destaca-se a modulação de genes que codificam proteínas de Heat Shock (Hsp) que respondem a condições de estresse e facilitam a sobrevivência do fungo sobre diversos desafios. A partir da análise do dados foram escolhidos genes envolvidos com patogenicidade e resposta à drogas, afim de validar os dados de microarray por PCR quantitativo. Podemos destacar, a repressão dos genes codificadores da Hsp90 e de uma de suas co-chaperonas, a Cdc37, na presença de solamargina, que podem ser alvos atraentes para estudo de novos antifúngicos, por estarem envolvidos com a adaptação do fungo em condições adversas.